干貨分享:LB培養(yǎng)基怎么配制?

LB培養(yǎng)基，是微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)中常用的培養(yǎng)基，用于培養(yǎng)大腸桿菌等細(xì)菌，其分為液態(tài)或是加入瓊脂制成的固態(tài)培養(yǎng)基。加入抗生素的 LB 培養(yǎng)基可用于篩選以大腸桿菌為宿主的克隆。

盡管該培養(yǎng)基的名稱被廣泛解釋為L(zhǎng)uria-Bertani 培養(yǎng)基，然而根據(jù)其發(fā)明人貝爾塔尼(Giuseppe Bertani)的說(shuō)法，這個(gè)名字來(lái)源于英語(yǔ)的 lysogeny broth，即溶菌肉湯。

LB培養(yǎng)基的配制：

1.成分

胰蛋白胨(tryptone)10g

酵母提取物(yeast extract)5g

氯化鈉(NaCl)10g

固體培養(yǎng)基另加 瓊脂粉 15-20g

加雙蒸水至1000mL, 用5mol/L NaOH（約0.2ml）調(diào)pH至7.2，121℃滅菌30min

2.配制方法

①稱量 分別稱取所需量的胰化蛋白胨、酵母提取物和NaCl，置于燒杯中。

②溶化 加入所需水量2/3的蒸餾水于燒杯中，用玻棒攪拌，使藥品全部溶化。

③調(diào)pH 用1mol/L NaOH溶液調(diào)pH至7.2。

④定容 將溶液倒入量筒中，加水至所需體積。

⑤加瓊脂 加入所需量瓊脂，加熱融化，補(bǔ)足失水。

⑥分裝、加塞、包扎。

⑦高壓蒸汽滅菌100Pa滅菌20min。

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