ELISA實(shí)驗(yàn)中緩沖溶液等試劑的配置

ELISA實(shí)驗(yàn)中是以抗原和抗體的免疫反應(yīng)為基礎(chǔ)，ELISA試劑以及各種溶液如何配置?zui近剛做了下ELISA實(shí)驗(yàn)，把各種ELISA配置方法匯總?cè)缦拢海?）　ELISA實(shí)驗(yàn)包被緩沖液（2）　ELISA實(shí)驗(yàn)洗滌緩沖液（2）　ELISA實(shí)驗(yàn)洗滌緩沖液（3）　ELISA實(shí)驗(yàn)稀釋液;（4）ELISA實(shí)驗(yàn)終止液（5）ELISA底物緩沖液（6）ELISA實(shí)驗(yàn)TMB（四甲基聯(lián)苯胺）使用液（7）　ELISA實(shí)驗(yàn)ABTS使用液（8）ELISC。

試劑

（1）　ELISA實(shí)驗(yàn)包被緩沖液（PH9.6 0.05M碳酸鹽緩沖液）:

NaHCO3    1.59克

NaHCO3　 2.93克

加蒸餾水至1000ml

（2）　ELISA實(shí)驗(yàn)洗滌緩沖液（PH7.4 PBS）：0.15M

KH2PO4 　　　　   　0.2克

Na2HPO4·12H2O　　2.9克

NaCl　　　　　   　　8.0克

KCl　　　　　　　 　0.2克

Tween-20　0.05%　  0.5ml

加蒸餾水至1000ml

（3）　ELISA實(shí)驗(yàn)稀釋液：

牛血清白蛋白（BSA） 0.1克

加洗滌緩沖液至100ml

或以羊血清、兔血清等血清與洗滌液配成5～10%使用。

（4）　ELISA實(shí)驗(yàn)終止液（2M　H2SO4）：

蒸餾水178.3ml，逐滴加入濃硫酸（98%）21.7ml。

（5）　ELISA底物緩沖液（PH5.0磷酸棗檸檬酸）:

0.2M Na2HPO4（28.4克/L）              25.7ml

0.1M 檸檬酸（19.2克/L）　　　　　 24.3ml

加蒸餾水50ml。

（6）　ELISA實(shí)驗(yàn)TMB（四甲基聯(lián)苯胺）使用液:

TMB（10mg/5ml無水乙醇）   0.5ml

底物緩沖液（PH5.5）　　　   10ml

0.75%H2O2                           32μl

（7）　ELISA實(shí)驗(yàn)ABTS使用液:

ABTS　　　　　　　　0.5mg

底物緩沖液（PH5.5）　    1ml

3%H2O2                          2μl

（8）ELISA實(shí)驗(yàn)封閉液：

牛血清白蛋白（BSA） 5克

加洗滌緩沖液至100ml。

值得一提的是有的封閉液中含有脫脂奶粉，不適合長(zhǎng)期保存。