科研時(shí)節(jié)忙碌紛紛 ELISA準(zhǔn)確性這樣驗(yàn)證

    本學(xué)期就要結(jié)束了，科研時(shí)節(jié)忙碌紛紛，不少客戶們正在準(zhǔn)備即將開始的實(shí)驗(yàn)與春節(jié)后的試劑盒預(yù)購(gòu)。ELISA實(shí)驗(yàn)得以大家的喜愛是因?yàn)槠溆兄哽`敏、高特異性、準(zhǔn)確性好等特點(diǎn)。

    近日，我公司何在售后服務(wù)問題處理過程中，接到了曹老師的，曹老師說：“ELISA方法的準(zhǔn)確性一般會(huì)用LC、LC-MS或者LC-MSMS做驗(yàn)證，因?yàn)槲业姆椒ㄉ婕暗叫》肿铀幬锏难苌鷾y(cè)定，所以液相的方法達(dá)不到回收率，請(qǐng)問有沒有其他的方法可以用來驗(yàn)證ELISA方法的準(zhǔn)確性呢？有沒有這種可能是我的藥物衍生體系本身這種方法與液相的流動(dòng)相沖突，不適合用液相去測(cè)定？"

    對(duì)曹老師的疑問，上海恒遠(yuǎn)技術(shù)專員做出的細(xì)致的分析：

    通常用ELISA方法檢驗(yàn)出來的陽性樣品，需要用LC、LC-MS、GC-MS或者LC-MSMS做確證，因?yàn)镋LISA方法的存在約5%左右的假陽性。究竟用上述的哪一種方法去確證其準(zhǔn)確性，是要根據(jù)被測(cè)組分的理化性質(zhì)決定的，例如組分在300度也不能夠汽化，肯定不能用GC-MS；組分結(jié)構(gòu)中有共軛，存在 n→π躍遷,π→π躍遷，一般會(huì)用HPLC紫外檢測(cè)器；若組分具有熒光或者通過衍生化反應(yīng)可以定量產(chǎn)生具有熒光的物質(zhì)，則會(huì)用HPLC熒光檢測(cè)器。以此類推，究竟用什么方法確證取決于被測(cè)組分的理化性質(zhì)，而不是憑空想象。