恒遠(yuǎn)實(shí)驗(yàn)：勘測(cè)丙二醛的方法步驟

恒遠(yuǎn)實(shí)驗(yàn)：勘測(cè)丙二醛的方法步驟

    丙二醛被簡(jiǎn)稱為MDA，它是常用的膜脂過(guò)氧化指標(biāo)，在酸性和高溫度條件下，可以與硫代巴比妥酸(TBA)反應(yīng)紅棕色的*川，其zui大吸收波長(zhǎng)在532nm。
    在實(shí)驗(yàn)步驟之前我們要有一個(gè)相應(yīng)的準(zhǔn)備工作。首先，本次實(shí)驗(yàn)的原理得要了解一下，我們接著前面的來(lái)說(shuō)明一下，測(cè)定植物組織中MDA時(shí)受多種物質(zhì)的干擾，其中zui主要的是可溶性糖，糖與TBA顯色反應(yīng)產(chǎn)物的zui大吸收波長(zhǎng)在450nm，但532nm處也有吸收。
    植物遭受干旱、高溫、低溫等逆境脅迫時(shí)可溶性糖增加，因此測(cè)定植物組織中MDA—TBA反應(yīng)物質(zhì)含量時(shí)一定要排除可溶性糖的干擾。低濃度的鐵離子能夠顯著增加TBA與蔗糖或MDA顯色反應(yīng)物在532、450nm處的消光度值，所以在蔗糖、MDA與TBA顯色反應(yīng)中需一定量的鐵離子，通常植物組織中鐵離子的含量為每克千重100—300ug·g-1，根據(jù)植物樣品量和提取液的體積，加入Fe3+的終濃度為0．5umol·L-1。
    以上為勘測(cè)丙二醛的實(shí)驗(yàn)原理，終于要進(jìn)入測(cè)量的方法環(huán)節(jié)了，丙二醛的提取稱取剪碎的試材1g，加入2mll0%TCA和少量石英砂，研磨至勻漿，再加8mlTCA研磨，勻漿在4000r·min-1離心10min，上清液為樣品提取液。
    顯色反應(yīng)和測(cè)定 吸取離心的上清液2ml(對(duì)照加2ml蒸餾水)，加入2ml 0．6%TBA溶液，混勻物于沸水浴上反應(yīng)15min，迅速冷卻后再離心。取上清液測(cè)定532、600和450nm波長(zhǎng)下的消光度。
勘測(cè)丙二醛的實(shí)驗(yàn)結(jié)果：